• BUGA-TeloCol ürününü çalışmak istediğiniz miktara uygun olarak tartın ve/veya derişimini belirledikten sonra uygun hacimli bir kaba alın.
• Liyofilize ürünü tarttıktan sonra çalışacağınız hacme uygun olarak 0,01 M hidroklorik asit veya 0,5 M Asetik asit çözeltisi hazırlayın.
• Liyofilize ürünü ve hazırladığınız asit çözeltisini uygun bir karıştırma kabında (borosilikat beher veya şişe vb.) manyetik balık ve karıştırıcı ortamında çözününceye kadar yavaş bir rpm hızında (tercihen 350-500 rpm) karışmaya bırakın. Pipetaj yaparak da çözebilirsiniz. Bu esnada hazırladığınız konsantrasyona bağlı olarak jelleşme olabilir, yoğun pipetaj ile çalışmanıza devam edebilirsiniz.
• Hazırlanan çözelti hemen kullanılmayacaksa +4 °C buzdolabında saklanabilir.
• Not: Çözünen üründe dondurma işlemi yapılması önerilmez.
• Önemli Not: Çözelti oluşturduktan sonra hızlı karıştırma, çalkalama veya vorteksleme üründe çapraz bağlanmaya neden olacağından bu işlemleri uygulamayınız.

Kaplama Prosedürü
• Yukarıda anlatıldığı gibi BUGA-TeloCol çözeltisi hazırlanır. Gerekirse, istenilen hacime seyreltme yapılır. Seyreltme işlemleri çözeltinin hazırladığı asit çözeltisi ile (0,01 N hidroklorik asit veya 0,5 N asetik asit) yapılmalıdır. Seyreltme sonrası homojen görüntü oluşuncaya kadar karıştırın.
• Tüm yüzeyin kaplandığından emin olarak kültür yüzeyine uygun miktarda seyreltilmiş BUGA-TeloCol ekleyin.
• Oda sıcaklığında, üstü kapalı olarak 1-2 saat inkübe edin. Kalan malzemeyi aspire edin veya yüzey kuruyana kadar oda sıcaklığında inkübe edin.
• Kaplanmış yüzeyleri steril ortam veya PBS ile dikkatlice durulayarak, yüzeylerin çizilmesini önleyin.
• Kaplanmış yüzeyler kullanıma hazır olup ve steril koşullar altında 2-10°C’de saklayın.

3-D Jel Hazırlama Prosedürü (Nötralizasyon Solüsyonu İle)
Not: Kolajenin hazırlanması sırasında kolajen ve diğer çalışma çözümlerinin soğutulması ve buz üzerinde tutulması önerilir.
• İstenilen kolajen miktarını belirleyin ve yukarıda anlatıldığı gibi BUGA-TeloCol çözeltisini hazırlayın.
• Soğutulmuş nötrleştirme solüsyonunun 1 kısmını steril bir karıştırma kabına veya tüpüne aktarın.
• Nötrleşme solüsyonu ile kolajeni yavaş bir şekilde karıştırın.
• Karışımı yavaşça çalkalayın veya karıştırmak için pipetaj yapın (Vorteksleme önerilmez)
• Kolajen karışımını istenilen steril plakalara veya kültür kaplarına dağıtın.
• Jel oluşumu için 37°C’de 1 saat inkübe edin. 3 Boyutlu Jel Hazırlama Prosedürü (Nötralizasyon Solüsyonu Kullanılmadan)
• Soğutulmuş 10xPBS veya 10x kültür ortamını kolajen çözeltisine hafifçe karıştırarak ekleyin.
• Steril 0,1 M Sodyum hidroksit kullanarak karışımın pH değerini 7,2-7,6’ya ayarlayın. pH değerini dikkatle izleyin (pH metre, fenol kırmızısı veya pH kağıdı kullanabilirsiniz) ve yavaş bir şekilde karıştırın.
• Steril su ile son hacmi toplam 10 parçaya ayarlayın ve karıştırın.
• Jelleşmeyi önlemek için karışımı 2-8°C arasında tutun.
• BUGA- Telocollagen karışımını istenen steril plakalara veya kültür kaplarına dağıtın.
• Jel oluşturmak için 37°C’ye ısıtın ve jel oluşumu için yaklaşık 30 ila 60 dakika bekleyin.

• Hücre kültürü çalışmaları
• Yüzey kaplamaları
• Biyopolimer uygulamaları
• Malzeme mühendisliği
• Hidrojel çalışmaları için uygundur.
• Sadece araştırma-geliştirme çalışmalarında kullanım amaçlıdır.

• Mull, V., & Kreplak, L. (2022). Adhesion force microscopy is sensitive to the charge distribution at the surface of single collagen fibrils. Nanoscale Advances, 4(22), 4829-4837.
• Slyker, L., Diamantides, N., Kim, J., & Bonassar, L. J. (2022). Mechanical performance of collagen gels is dependent on purity, α1/α2 ratio, and telopeptides. Journal of Biomedical Materials Research Part A, 110(1), 11-20.
• Kolodziejska, B., Pajchel, L., Zgadzaj, A., & Kolmas, J. (2022). A New, Biomimetic Collagen–Apatite Wound-Healing Composite with a Potential Regenerative and Anti-Hemorrhagic Effect in Dental Surgery. Materials, 15(24), 8888.
• Younesi, M., Donmez, B. O., Islam, A., & Akkus, O. (2016). Heparinized collagen sutures for sustained delivery of PDGF-BB: Delivery profile and effects on tendon-derived cells In-Vitro. Acta biomaterialia, 41, 100-109.
• Younesi, M., Knapik, D. M., Cumsky, J., Donmez, B. O., He, P., Islam, A., ... & Akkus, O. (2017). Effects of PDGF-BB delivery from heparinized collagen sutures on the healing of lacerated chicken flexor tendon in vivo. Acta biomaterialia, 63, 200-209.
• Chattopadhyay, S., & Raines, R. T. (2014). Collagen‐based biomaterials for wound healing. Biopolymers, 101(8), 821-833.
• Vojtaššák, J., Bakoš, D., Danihel, Ľ., Krištín, J., Böhmer, D., Danišovič, Ľ., & Blaško, M. (2001). In vitro cytotoxicity testing of coladerm membrane. Cell and Tissue Banking, 2, 225-233.
• Drzewiecki, K. E., Grisham, D. R., Parmar, A. S., Nanda, V., & Shreiber, D. I. (2016). Circular dichroism spectroscopy of collagen fibrillogenesis: A new use for an old technique. Biophysical journal, 111(11), 2377-2386.
• Wingender, B., Bradley, P., Saxena, N., Ruberti, J. W., & Gower, L. (2016). Biomimetic organization of collagen matrices to template bone-like microstructures. Matrix Biology, 52, 384-396.
• Burla, F., Tauber, J., Dussi, S., van Der Gucht, J., & Koenderink, G. H. (2019). Stress management in composite biopolymer networks. Nature physics, 15(6), 549-553.